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操作移液器的步驟一共有幾步
  • 發(fā)布日期:2022-12-13      瀏覽次數(shù):1799
    •   移液器的作用就是移液,移液的基本操作可以總結(jié)為以下六個步驟。
        移液八部曲:移液器情況檢查;設定容量值;裝槍頭;預洗槍頭;吸液;排液;退槍頭;移液器清理歸位。
        ▼移液槍狀況檢查
        很多資料上都是寫的移液器操作六部曲,但是我們認為,使用移液器首先要做的就是移液器的狀況檢查。檢驗內(nèi)容可參考:刻度是否在正確位置,如果上次使用完,未調(diào)整到正確位置,就需要提醒,甚至需要重新校驗;驗證移液槍吸取的精度,經(jīng)常使用移液器,都會大概知道液位的位置,要細心觀察,當然可以進行精度檢驗;觀察移液槍是否漏液的情況,對于老舊的移液器就要注意槍頭和移液器結(jié)合不緊密,導致滴液的問題;另外試用一下移液器,感覺移液器吹吸是否正常,比如有出現(xiàn)移液器反彈不夠利索,那就是出問題了;檢查移液器和槍頭接觸位置是否滿足你的要求,特別是在做微生物無菌操作的情況下。
        再次強調(diào)移液器狀況檢查的重要性,拿一個不準確的移液器去做實驗,帶給你的只能是不準確的結(jié)果。
        ▼設定容量值
        選定正確的移液器,在吸頭最大量程的35-100%范圍內(nèi)操作可提高操作準確性與重復性。
        在調(diào)節(jié)槍的過程中切忌超過最大或最小量程,以免損害移液槍的精確度。
        ▼放液
        看了一些放液操作的介紹,其實我們認為,放液的核心就有一點:保證你吸取的液體全部進入你的體系內(nèi),并且每次的操作都是一致的。比如有人說槍頭緊貼器壁放液,這對于小體積進入大容器就是非常不可取的。因此放液沒有固定的什么方法,需要自己根據(jù)不同的情況去區(qū)別對待。
        ▼退槍頭
        槍頭不要亂扔, 避免其進入下水道。
        ▼清理歸位
        對照前面移液器的狀況檢查,在使用完移液器后,要將移液器調(diào)回最大量程,檢查移液器是否有污染物進入,并及時清理,將移液器放在合適的位置,避免損壞。
        避免“機械回沖”,當由小量程調(diào)節(jié)至大量程時,朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn),旋轉(zhuǎn)到達超過所需量程1/3圈處再回調(diào)至所需量程,這樣可避免“機械回沖”,確保更高準確性。當由大量程調(diào)節(jié)至小量程時,直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程
        ▼裝槍頭
        正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動即可使其緊密結(jié)合,不要過于用力。
        在將槍頭(pipette tips)套上移液槍時,很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這是錯誤的做法,因為這樣會導致移液槍的內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至會導致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。
        ▼預洗
        用同一樣品重復吸液排液二至三次。對于微量移液器,該操作有助于內(nèi)壁吸附,并且可以使大量程吸頭內(nèi)部的空氣等于樣品溫度,保證操作的一致性。
        注意高溫或者低溫液體請不要潤洗,溫度對槍頭的內(nèi)部表面積會有影響,影響槍頭的牢固程度和槍頭吸附液體的量,影響精度。
       有機液體和高揮發(fā)性液體,由于其揮發(fā)會在套筒內(nèi)形成負壓,從而產(chǎn)生漏液的情況,因此要增加預洗的次數(shù)至六次,使得套筒內(nèi)氣體飽和,避免漏液。
        粘稠液體,預洗要慢,要保證預洗達到實際吸取液體的位置。
        ▼吸液
        吸取液體時注意以下幾點即可:速度適宜,減少槍頭外壁沾有液體的量,是否有空氣。
        速度不能過快,過快就會吸入空氣,過快你還需要等待(特別是對于粘稠的液體),或?qū)е挛〔粶蚀_,吸取過快還容易導致液體進入移液器內(nèi)部,特別是酸堿性物質(zhì),會損壞移液器。
    魏經(jīng)理
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